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正信專 共創(chuàng)美好生活
12-142023
601
克氏原螯蝦細胞色素c基因通過調(diào)節(jié)凋亡途徑抑制WSSV感染
摘要:細胞凋亡是由一系列相關基因嚴格調(diào)控的細胞程序性死亡,在抵御病原入侵、維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)等方面有著重要意義。其中細胞色素c從線粒體釋放到細胞質(zhì)中是凋亡開始的關鍵一步。本研究利用RACE技術首次克隆獲得了克氏原螯蝦(Procambarus clarkii)細胞色素c基因(PcCytc),全長為897 bp,包括163 bp的5′-UTR、419 bp的3′-UTR和315 bp的開放閱讀框,編碼104個氨基酸。定量PCR檢測結果顯示,PcCytc基因在克氏原螯蝦的各組織中均有表達,其中在鰓、腸道和肌肉中表達高,在胃中表達最低。WSSV感染實驗顯示,在病毒感染后PcCytc在肝胰腺、腸道和肌肉組織中的表達水平均出現(xiàn)上調(diào),并在24 h達最高值,約是此時PBS組表達量的2.65、2.07和2.20倍,均存在極顯著性差異(P<0.01)。PcCytc基因干擾后,克氏原螯蝦體內(nèi)WSSV病毒拷貝數(shù)顯著增加(P<0.05),表明PcCytc能夠抑制WSSV在克氏原螯蝦體內(nèi)的復制,延遲感染;同時,凋亡相關基因bcl-2、bax和caspase-3的表達均發(fā)生顯著上調(diào)或下調(diào)(P<0.05)。本研究表明,PcCytc可通過調(diào)節(jié)凋亡途徑抑制WSSV感染,為克氏原螯蝦對WSSV感染的免疫反應提供了新的見解。 


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