摘要：為探尋大黃魚（Larimichthys crocea）內(nèi)臟白點病防治中使用的抗生素替代物，降低水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)抗生素的使用量，促進水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展，研究了乳酸鏈球菌素Z（nisin Z）與抑菌劑（11種水產(chǎn)獸用抗生素、5種食品添加劑）復配對大黃魚內(nèi)臟白點病致病菌——變形假單胞菌（Pseudomonas plecoglossicida）的體外抑制作用：首先，利用96孔微量稀釋法測定乳酸鏈球菌素Z與各抑菌劑的最小抑制濃度（minimum inhibition concentration, MIC）;其次，采用96孔微量稀釋法結(jié)合棋盤法測定乳酸鏈球菌素Z與抑菌劑復配最小抑制濃度和分級抑菌濃度（fractional inhibitory concentration, FIC）;最后，采用平板計數(shù)法繪制24 h殺菌曲線，結(jié)合電鏡觀察結(jié)果，進一步確定乳酸鏈球菌素Z與抑菌劑復配對變形假單胞菌的抑菌效果。結(jié)果顯示，乳酸鏈球菌素Z單獨使用對變形假單胞菌無抑制作用，與水產(chǎn)獸用抗生素磺胺嘧啶（SD）或食品添加劑乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-2Na）分別復配后具有協(xié)同抑菌作用。乳酸鏈球菌素Z最低復配濃度為3 125 mg·L-1,此時SD的MIC從128 mg·L-1降至32 mg·L-1,FIC指數(shù)為0.25（FIC≤0.5）;EDTA-2Na的MIC值從400 mg·L-1降至200 mg·L-1,FIC指數(shù)為0.5（FIC≤0.5）。殺菌曲線與電鏡觀察顯示，乳酸鏈球菌素Z與EDTA-2Na復配用藥后變形假單胞菌表面粗糙、細胞膜邊界模糊、細胞結(jié)構(gòu)遭到破壞，24 h內(nèi)有效抑制了變形假單胞菌的生長繁殖；乳酸鏈球菌素Z與SD復配用藥使變形假單胞菌細胞結(jié)構(gòu)嚴重破壞、細胞膜溶解、胞內(nèi)物質(zhì)明顯外泄，在8 h內(nèi)完全殺滅細菌。研究表明，乳酸鏈球菌素Z與EDTA-2Na或SD復配均提高了抗生素的抗菌活性，將該技術(shù)應用于治療大黃魚內(nèi)臟白點病可以降低抗生素的使用量，具有實際應用價值。
